FAQ: 如何测定藻细胞油脂含量

对于已经分离了的微藻也可以通过96孔板筛选方法进行快速高通量测定其各种类微藻的油脂含量。通常的做法就是将待测定的微藻分别用96孔板培养240μl,每个样品至少做三个复孔。为了避免边缘效应,96孔板的边沿的微孔应该不加入样品而加入相应的培养基,处理好的96孔板放置于光照培养箱中培养。最后在一定时期内加入1μl浓度为0.5mg/ml的尼罗红染液进行染色10min后在荧光酶联免疫酶标仪中测定荧光强度。尼罗红染色法在一些细胞壁比较薄,柔软的种类中得到很好的应用,如黄藻纲、金藻纲、硅藻纲等。但是对于部分藻细胞壁较厚较严密的微藻类,简单的尼罗红染色法所测能检测到的荧光信号强度并不理想,如绿藻属。这时,如在染色时加入微量的DMSO溶液,可使尼罗红更容易通过藻细胞壁,从而有效增强荧光信号的强度,扩大了尼罗红荧光染色在筛选高产油脂微藻中的应用范围。林义等人将尼罗红染液直接加入到分离培养基,对358株产油酵母进行筛选,在280-300nm紫外光照射下,辨别高产油菌株,并获得产油量高达62.9%的菌株。

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