FAQ: 关于海水高温高压灭菌后析晶问题

藻类培养过程中通常海水需要高压灭菌,无论是人工海水还是自然海水,经0.45/0.22微米滤膜先后过滤之后进行灭菌。但冷却时经常会遇到海水析晶现象:海水里出海针状结晶。有时候即使不打开灭菌锅,一直等海水在灭菌腔自然冷却,仍会出现析晶现象。

原因大概如下:

1.灭菌后体积减少,挥发太多导致盐分析出。

小体积(100毫升以下)可以用0.22微米滤膜过滤除菌。若必须高压灭菌,通常先灭大瓶海水和小空瓶,然后分装。

2.灭菌温度过高,水分蒸发太多而析晶。

我们通常设置灭菌条件:110~115℃,20~30分钟。次验证表明,不会出现析晶现象。

3.瓶子包扎太严实,内外气压失衡,海水大量喷出。

因此,瓶口勿包扎太紧,灭菌结束取出再拧紧即可。

4.灭菌之后海水最好是自然冷却,水浴降温海水易结晶。

通常是灭菌完成后温度降到70度以下立即取出于室温自然冷却。忌设置保温过夜。

5.营养盐各组分互相反应形成螯合物。

因此,高浓度营养盐母液(NaNO3,NaH2PO4,Vitamins,Trace Metal,EDTA,NH4HCl等等)需要分开配制和保存。灭菌前或接种前添加,添加时用0.22微米滤膜过滤。

此外,硅藻培养实验需要添加硅酸盐(Na2SiO3.9H2O),如果加到海水再灭菌会出现乳白色沉淀。一般也是接种前添加,可用0.22微米滤膜过滤。

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