在生物技术应用中,光合作用效率是评估自养生物性能的核心指标,其精准量化对菌株筛选、工艺优化具有关键指导意义。然而,传统检测方法存在显著局限,仅能提供有限的间接观测结果,且时间分辨率低下,难以捕捉光合作用动态变化过程,严重制约了光生物技术领域的研发进程。为破解这一技术瓶颈,本研究创新性地开发了光热呼吸测定法,这一非侵入式新型技术实现了光合作用能量转化的实时直接量化,为相关研究提供了全新解决方案。
为突破现有技术瓶颈,本研究引入并验证了一种新型测量方法——光热呼吸测定法。该方法的核心创新在于,通过高灵敏度的微量热仪,同步、连续地测量光合生物在光照条件下的两项关键生理通量:代谢热通量(反映包括散热在内的所有生化反应的总能量变化)和释氧速率(直接表征光反应中光系统II的活性)。这种同步测量实现了对光合作用能量转化的直接“实时簿记”,将光能输入、化学能储存(以氧气释放为标志)以及不可避免的能量耗散(以热形式释放)整合于同一观测框架内。
该技术的核心优势在于多参数同步测量与全过程覆盖能力:通过同步捕获代谢热通量和释氧速率两大关键指标,能够完整涵盖光合作用的光反应与暗反应全过程,同时精准捕捉所有散热副反应,克服了传统方法仅能反映部分反应阶段的缺陷。与传统间接观测手段相比,光热呼吸测定法无需侵入式操作,避免了对生物样本生理状态的干扰,且具备高时间分辨率,可实时追踪光合作用效率的动态变化。

以模式自养生物集胞藻 PCC 6803 为研究对象,该技术取得了一系列精准量化结果:测得其最大守恒能量通量为 5.2±0.8 W・gCDW⁻¹,光能产率达 26.4±5.8 kJ・gCDW⁻¹;通过分析热通量与氧通量间的强相关性,计算得出氧热当量为 488.5±0.3 kJ・mol⁻¹ O₂。此外,研究还系统表征了光合效率的动态特征,明确其存在光饱和现象,测得最大光合效率为 2.3±0.4%,半饱和光强为 360 mmol・m⁻²・s⁻¹,为深入理解光合作用调控机制提供了关键数据支撑。
光热呼吸测定法的核心创新在于成功整合了热力学与呼吸作用数据,构建了多维度、高精度的光合作用效率评估体系。该技术不仅填补了现有方法在实时直接量化方面的空白,更凭借其非侵入性、高分辨率的优势,为光生物技术领域的菌株筛选、工艺优化提供了可靠的技术工具,有望推动微藻固碳、生物能源生产等相关产业的技术升级,为自养生物的工业化应用奠定坚实基础。
原文链接:Direct real-time determination of photosynthetic efficiency by photo-calorespirometry using Synochocystis sp. PCC 6803 as model cyanobacterium