硅藻的样品不能简单使用甲醛或者其他试剂固定，时间久了色素退化或者硅质壳被化学分解掉，本文收集了杨德广、杨美临、黄玥、李家英、刘俊琢等5位专家的硅藻制备方法，仅供大家选择参考。
杨德广.400年来吉林省二龙湾玛珥湖硅藻组合变化及其生物多样性.中国地质大学,2011.
硅藻的制备方法
2009 年 6 月进行了硅藻样品的提取，实验室工作流程如下：
1.溶液的配制方法
用 36%的盐酸配制 10%的盐酸的方法
（1）取 36%的浓盐酸 150 ml
（2）取蒸馏水 350 ml
（3）将浓盐酸缓慢地加入 350 ml 的蒸馏水中，边加入边搅拌，配成 500 ml10%的盐酸
2.硅藻的制备步骤
（1）目的：除去样品中的有机质和碳酸钙
（2）方法：加 H2O2去除有机质，加 HCl 去除 CaCO3
3.步骤
（1）加 H2O2 2ml,观察反应，防止溢出
（2）1 小时后再加 2 ml H2O2, 观察反应，防止溢出
（3）1 小时后先加 1 滴 HCl，反应平静后再加 2 ml H2O2
（4）1 小时后再加 2 ml H2O2观察
（5）1 小时后先加 1 滴 HCl，反应平静后再加 2 ml H2O2
（6）静置 24 小时
（7）用水清洗至中性，其过程是：
a 将试管中的溶液倒出，严防样品流出
b 用去离子水将样品完全冲开，静置，将试管中的溶液再倒出，严防样品流出
c 反复操作 b 步骤直至样品中的溶液呈中性
4.注意：
（1）每次加入 H2O2不可超过 2 ml
（2）每次加入 HCl 不可超过 2 滴
（3）在实验过程中，加入 H2O2和 HCl 时，观察样品反应的剧烈程度，如果样品反应剧烈，滴入乙醇
5.2009 年 10 月将制备好的硅藻化石水样制成玻片
杨美临.博斯腾湖多代用指标（侧重硅藻）记录的全新世气候变化模式.兰州大学,2008.
本研究中,钻孔BSTC001的硅藻样品基本按照间隔scm取样,有效分析样品(统计至少300valves)共计179个,并随机选取其中20个样品进行重复性实验,以求鉴定的准确性”硅藻样品的预处理和载片的制作均采用ECRC标准硅藻处理方法(Battarbee,1986)”实验具体步骤如下:
取样:称取冷冻干燥后的沉积物样品0.01司.059,放入15ml的离心试管中”
去除有机质:加入适量的30%的双氧水(H2O2),轻轻摇动离心试管,使样品完全与H20:接触，而后进行水浴(70度)加热,直至有机质被除掉后,将样品离心,去除上清液”该步骤中需要注意:[l]加入的H2O:不易过多,应低于5ml,以免在加热过程中由于反应过于剧烈而使样品溢出;[2]水浴加热过程中,需不时观察样品反应的程度,以避免样品混和液被完全蒸干; [3]在离心过程中离心机的转速不易过高,以免造成样品中硅藻过度压实而破碎,控制在1200转/分钟为宜,每次的操作时间为4分钟。
去除钙质胶结物质:向离心后的样品加入适量的15%的稀盐酸(HCL),在水浴加热中进行直至反应停止放出气泡为止,样品在室温下静置一夜”该步骤加入稀HCL不仅可去除钙质胶结化合物,还能去除以上步骤中剩余的双氧水”
水洗离心:将去钙后的样品用蒸馏水清洗并离心3-4遍,直至洗至中性”
浮选:加入比重2.4留ml的碘氢酸重液,仔细搅拌5分钟后离心,浮选二次,目的是去除其他无机物质”该步骤主要用于处理含砂的粗颗粒沉积物”
透明处理，水洗离心:将上部浮选液倒入烧杯中,直接加入含有1%冰醋酸的蒸馏水冲稀并静置一夜,随后多次水洗离心至中性”如果是细颗粒湖相沉积物,则直接加入1-2滴稀氨水,最后定量成10ml的硅藻悬浮液用于制片”
封片:将处理好的样品用微量移液管(注射器)取定量100闪滴于洁净的盖玻片上,待自然干燥后,滴一滴硅藻胶(Naphrax)封片,稍稍烘干即可”待硅藻胶完全干燥凝固后即完成硅藻永久载片,然后放于标本盒中用于显微镜观察”每个样品制片2张”
黄玥.末次冰期以来南海及日本海硅藻及其古环境变化.华东师范大学,2009.
所有硅藻样品的处理均依据Hansson(1984)方法进行,主要处理步骤如下:
1)去钙质,在装有硅藻样品的试管中加入浓度为10%-15%的稀盐酸,待样品与盐酸初步反应后搅拌均匀并静置12一24h,然后用蒸馏水水洗3次;
2)去有机质,加入浓度为30%的双氧水,待样品与双氧水初步反应后置于恒温水浴锅中(70度)加热1-2小时,其后将样品从水浴锅中取出,同样用蒸馏水水洗3次;
3)制片,用玻棒将样品均匀涂于载玻片上,滴上Naphrax胶(折射率dn=1.73),盖上盖玻片,然后在电热板上加热(150-200℃),待玻片冷却后保存于样品盒中
李家英.南海北部陆坡ODP1144站位第四纪硅藻及其古环境演变.地质评论,2002.
硅藻分析样品取自ODP1144站位,该站位位于南海东北部大陆坡上,水深2037m,孔深近800m。硅藻样品分析集中在ODP1144站位(综合剖面)180m以上沉积段,该段沉积物相当均一,其岩性为半深海陆缘淤泥。目前鉴定完成了164个样(不包括重样19个)。硅藻样品的处理主要根据Sehrader(1973)和Battarbee(1986)方法进行:每个样取2g烘干样先用10%HCL去钙,水洗后加人30%H2O2煮沸至沉积物呈灰白色,水洗净后,用2.4重液浮选2次,洗净集中浮选物,用Hyrax胶做定量制片,在100X油镜下进行属种鉴定,在40x镜下统计250一300个壳体(以镜下观察眼数为准),作为丰度计算(SehraderandGersonde,1978)。在鉴定过程中,特别注意到划分生物地层的标志种和反映古环境特征的替代指标种。
刘俊琢.青藏高原湖泊表层沉积物中硅藻分布特征及影响因素研究.2011.
硅藻样品的处理卜要参照Battarbee(1986)等的方下去进行:
(l)去除有机物质:每个样品准确称取0.1g左右,放入试管中,加入5 ml 30%的双氧水于70度条件下水浴加热3-4h,氧化除去样品中的有机物;
(2)去除钙质胶结化合物:在氧化过程结束后,加入适量10%的盐酸去除钙质胶结化合物及上一步中残留的双氧水,冷却,静置12h;
(3)清洗!离心:将去除钙质胶结化合物的样品用蒸馏水清洗并离心3一4次(1200r/min,8min),直至中性,倾去上清液;
(4)封片:将清洗至中性的硅藻样品悬浮液定容至10ml,并准确量取0.2ml均匀地涂在洁净的盖玻片上,自然晾干”待晾干后,滴一滴中性树胶于载玻片中央,将盖玻片翻转放于树胶上,封片,置于烘箱中130度烘干,待树胶彻底干燥!冷却凝固后即完成了硅藻永久载片,放于标本盒中用于显微镜观察,每个样品制片2张。